于和伟身高179cm,1971年5月4日出生于辽宁省抚顺市东洲区的于和伟，上海戏剧学院96届表演本科班。2003年，参演高希希执导的电视剧《历史的天空》；2004年，参演电视剧《搭错车》，饰演反一号苏民生。2009年，在古装剧《三国》中饰演刘备。2011年，与王丽坤主演电视剧《青盲之越狱》。2011年获南方盛典最佳男演员奖，之后获得MSN星月年度最具价值男演员奖、第17届华鼎奖最佳男演员奖。2016年，主演三国战争题材权谋古装剧《军师联盟》和公安题材《警花与警犬》，中国内地男演员。
2003年，在高希希执导的电视剧《历史的天空》中饰演反一号“万古碑”；2004年，参演电视剧《搭错车》，饰演反一号苏民生。2005年参演电视剧《城市里的春天》，在该剧中饰演的一个典型的现代机关干部。2007年，出演高希希执导的伦理情感剧《男人底线》，饰演阴冷顽固的赵通达。2007年参演导演高希希执导的电视剧《纸醉金迷》，饰演一个投机倒把的奸商。2009年，在古装剧《三国》中成功饰演刘备。2010年，于和伟、罗海琼领衔主演亲情剧《幸福在路上》。2010年10月18日林永健、何赛飞、辛柏青、于和伟主演的47集电视连续剧《老马家的幸福往事》举行北京电视台首播发布会。2010年参演电视剧《新三国》，于和伟饰演的刘备。
2011年获南方盛典最佳男演员奖《幸福在路上》。2011年苏岩、于和伟、王丽坤、沙溢等联袂主演心理谍战剧《青盲》，饰演张海峰。2012年5月22日获得MSN星月年度最具价值男演员奖。