培养基的原材料可选用富含有机质的污泥、疏松剂和有机粪肥三类物质。其中污泥可选择鱼塘淤泥、稻田肥泥、污水沟边的黑泥等，疏松剂可用甘蔗渣，有机粪肥可用鸡粪、牛粪等。先在池底铺垫一层疏松剂，用量是每平方米2～3千克。随即铺上一层污泥，使总厚度达到每平方米10～12厘米，加水淹没基面，浸泡2～3天后施牛、鸡、猪粪，每平方米10千克左右。
接种前再在表面敷一层厚度3～5厘米的污泥，同时在泥面上薄敷一层发酵处理的麸皮与米糠、玉米粉等的混合饲料，每平方米撒150～250克；最后加水，使培养基面上有3～5厘米深的水层，新建池的培养基一般可连续使用2～3年，此后则应更新。每年秋季，当气温降至28℃左右时即可引种入池。红线虫的种源在城镇近郊的排污水沟、畜禽饲养场及屠宰场、糖厂、食品厂排放废物的污水沟等处比较丰富，可就近采种。
接种工作比较简单，即把采回的虫种均匀撒在池子的培养基面上即可。每平方米培养面积按500～750克接种为宜。红线虫特别爱吃具有甜味的粮食类饲料，畜禽粪肥、生活污水、农副产品加工后的废弃物均是它们的优质饲料。但是所投饲料应充分腐熟、发酵，否则它们会在池子内发酵产生高热“烧死”虫种与幼虫。粪肥可按常规在坑函里自然腐熟，粮食类饲料在投喂前16～20小时加水发酵，在20℃以上的室温条件下拌料，加水以手捏成团，丢下即散为度，然后铲拢成堆，拍打结实，盖上塑料布即可。
如果室温在20℃以下，需加酵母片促其发酵，用量是每1～2千克干饲料加1片左右，在头天下午15～16时拌料，第2天上午即能发酵熟化。揭开塑料布有浓郁的甜酒香即证明可以喂虫。接种后至采收前每隔10～15天，每亩追施腐熟的粪肥200～250千克；自采收开始，每次收后即可追施粪肥300千克左右，粮食类饲料适量，以促进红线虫快繁速长。投喂肥料时，应先用水稀释搅拌，除去草渣等杂物，再均匀泼洒在培养基表面，切勿撒成团块状堆积在池子里，且投料前务必关闭进水口，以免饲料飘流散失。
